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第九章
第一节 菌种的衰退与复壮的概念
1、退化(衰退):菌种在培养或保藏过程中,由于自发突变的存在,出现某些原有优良生产形状的劣化,遗传标记的丢失等现象,称为菌种的衰退。
原因:1、基因突变,主要原因,根本原因,基因突变引起的生产能力的下降,其中包括细胞内控制产量的基因突变或质粒脱落造成的。 2、分离现象。
3、连续移代(传代):是加速退化发生的直接原因。
菌种退化的表现:
1、菌落、细胞形态发生变化,2、生长速度减慢,产孢子越来越少。3、抵抗力下降,抗不良环境能力下降。4、代谢产物生产能力下降,对宿主寄生能力下降。
2、菌种的复壮:狭隘的复壮是指菌种已发生衰退的情况下,通过纯种分离和生产性能测定等方法,从衰退的群体中找出未衰退的个体,以恢复原有菌体。
二、菌种复壮的措施:1、纯种分离(平板划线法、涂布法、倾注法、单细胞挑取法),2、淘汰法(淘汰已衰退的个体),3、通过宿主体内生长进行复壮,4、采用有效的菌种保藏方法。
三、防止菌种衰退的方法:
采用减少传代,经常纯化,创造良好的培养条件,用单细胞移植传代和科学的保藏等措施,不但可以使菌种保持优良的生产能力,而且还能是已退化的菌种得到恢复提高。
第二节 菌种保藏
目的:1、存活、不丢失、不污染,2、防止优良性状丧失,3、随时为生产,科技提供优良品种。
方法:1、低温保藏法(斜面保藏方法):菌种管置于4度冰箱保藏,定时传代。原理:低温下,微生物代谢强度明显下降。 2、液体石蜡油低温保藏法:橡皮塞取代棉塞,加石蜡油。 3、干燥保藏法(沙土保藏法、滤纸保藏法……)。
4、真空冷冻干燥法:适用于各种微生物,便于大量保藏,菌种生长时间长。
5、液氮超低温保藏法:讲菌种置于保护剂中,预冷冻之后保护在液氮超低温冰箱中,使用于各种微生物的的较理想的保藏方法。
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